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液相进样阀的清洗

更新时间:2017-05-08        阅读:4132
  进样阀在进样过程中,必须是非常清洁的,否则得不到较好的结果。进样阀切换到进样位置(Inject)后,要在此位置保持一段时间,使活动相充分冲洗样品定量管,这样可以保证有较高的度,而且不用另外再冲洗样品定量管。这种由色谱仪器控制的冲洗显然要比手动冲洗更好些。
  留意:冲洗需要的活动相体积至少为所进样品体积的10倍。例如,假如取20μL样品至100μL样品定量管中,而活动相此时的流速为1mL/min,则需要在进样位置至少保持12s,即:20μL×10/1000μL·min-1=0.2min=12s。当样品定量管经过充分的冲洗后,可以将旋柄转回取样位置(Load),也可以继续保持在进样位置,到下次取样前才切换回取样位置。在切换回取样位置时,将样品进样针或微量样品进样针从进样阀中拔出,为防止交叉污染。正常情况下不必每次进样后都冲洗进样阀注射针导进口。进样阀内根据设计的直接连接进样孔,可以使注射针头的前端直接连接到样品定量管的末端,没有其他空间供样品残留。这样在下一次进样时,就不会有上一次残留的样品进进样品定量管。但是在进样针头插进或拔出过程中,会有痕量的样品沉积在针头密封区域。精密的测定显示这种残留有1nL~10nL。这表明进20L样品,会残留0.005%~0.05%。每次进样后冲洗注射针导进口可以将此残留冲洗干净。
  冲洗注射针导进口的过程为:设定活动相的流速为0.1mL/min~1mL/min,将注射针导进口冲洗头连接到一只体积相对较大的注射器上,用大量的活动相只在进样位置清洗注射针导进口。这样进进进样阀中的液体绕过样品定量管由样品溢出管5#口排出。这一过程可以将注射针导进口、引导管、注射针导进管和注射针密封圈*清洗。而采用注射器*插进式的冲洗方式,则不能全部清洗上述部分的表面。在取样位置将注射针插进注射针导进口时,针头推动注射针密封圈内少量样品液体(上一次冲洗注射针导进管留下的)进进样品定量管。当该样品液体与所用的活动相组成不同,且同时采用部分布满定量管进样方式时,在高灵敏度的检测器上可能出现怪峰。所以冲洗注射针时用活动相冲洗。
  假如已发现有严重的交叉污染现象,请检查是否有下列原因造成:
  ⅰ.使用的注射针头长度不够(针头的长度至少要5cm),注射针末端不能到达定子表面。
  ⅱ.注射针没有充分插进注射针导进口。
  ⅲ.注射针导进口内的污染物或针头密封磨损下来的削片,使注射针头末端不能接触定子表面。假如不考虑交叉污染,每进样10次或20次冲洗一下注射针导进口,这样可以保证注射针导进管内布满流体。在注射针插进或拔出的过程中,清洗注射针头或稀释污染这一区域的样品的同时也使注射针导进口和样品溢出5#口布满流体,从而防止空气进进样品管。
 

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