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如何对色谱柱进行保护以保持其柱效

点击次数:806 发布时间:2019-04-08

色谱柱使用一段时间后,常遇到柱子被污染,柱效会有一定程度的下降,采用适当的方法对色谱柱进行保护,可以延长色谱柱的使用寿命。


常规处理:

 

硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。

对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。

再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水←→甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。
 

样品和流动相的处理

 

溶解的样品进样前用滤膜过滤,以除去不溶物。如果必要,需进行样品的预处理。流动相中如有不纯物质将影响柱效,所以溶剂尽量使用色谱级别的,至少是分析纯级别,流动相使用前用微孔薄膜过滤。

在流动相的输液管前安装过滤器。过滤器定期用甲醇超声清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。对于堵塞严重的过滤器,可在火焰上灼烧后再清洗。

 

保护柱(预柱)的使用:

 

对于较昂贵的色谱柱,可以在柱前加一保护柱,防止样品中杂质污染分析柱,对于制备柱,因其进样量大,使用保护柱尤为重要。


美国Exformma公司采用独有的方法硅胶基质的表面进行重羟基化处理,消除了一些导致柱效下降的微孔,在硅胶上形成了一个非常光滑,酸性硅胶羟基位点少和分布均一的表面。Arcus系列色谱柱中包含EP-C18,WP-C18,EP-C8,WP-C8等,均是由一种全新的化学键合技术进行合成的。使Arcus系列色谱柱具有优异的分离特性,让一些通常难于进行的分离变得可能。另外美国Exformma公司的固定相完全封尾技术,使Arcus系列色谱柱具有极好的峰形和更长的使用寿命。
 
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