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你了解高效液相色谱分析柱吗?知道其柱体使用材料吗?

点击次数:217 发布时间:2020-05-06
   高效液相色谱分析柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱分析柱的制备和操作条件。
  色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。

  色谱分析柱柱材料:
  该柱管常采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管,以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀,使用前色谱柱管先用Trichloromethane、甲醇和水依次清洗,再用50%的hno3对柱内壁作钝化处理。钝化时使hno3在色谱柱管中至少滞留10min,以在柱内壁形成钝化的氧化物涂层。
  柱管也采用氟塑料、玻璃和玻璃衬里材料,主要是从抗腐蚀和易加工方面考虑。
 
  保证高效液相色谱分析柱的性能和寿命:
  1、认证阅读使用说明书
  2、使用填充良好的色谱分析柱。
  3、使用保护柱及在线过滤器。
  4、经常以强溶剂冲洗色谱分析柱。
  5、色谱分析柱使用温度Z好小于400C。
  6、尽量减少压力波动,避免机械及热冲击。
  7、在水流动相与缓冲浓液中加200ppm的叠氮钠。
  8、充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与保强留分成。
  9、过夜或储存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存。
  10、硅胶基质的的色谱分析柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0。
  11、流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%。
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