高效液相色谱柱在使用时要注意的问题
高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
柱效和保护柱
拿到一根新柱时,一定要先看其使说明,然后测柱效,定期检测柱效, 保留在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件, 定期检测仪器的谱带展宽。 若应用于在线监测, 应对色谱柱提供在线的物理保护和化学保护, 例如采取安装在线过滤器, 自装填料保护柱和预装保护柱等。在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效, 在需要高柱效的时候常用, 常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效, 特别是在用微柱时,常用的是普通 自装填料的保护柱。新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱, 它的特点是高质量、高效填料、 增加分析柱效、对脏样品载荷能力大 ,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,主要适用于脏、复杂的样品本底,例如生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情况。