c18色谱柱分离效能高。可选择固定相和流动相以达到较佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
c18色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
c18色谱柱需要怎么清洗?
一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而百盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。
如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。
冲洗方法:反相柱子最好保存度在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么,要看你的流动相。
比如,我用的是磷酸盐缓冲液-乙腈(70:30)的流动相,那么冲洗的时候最好选用10%-15%乙腈水,冲洗1.0ml/min,至少30min,最好40min。
如果第二天接着使用的话可以不*纯甲回醇或者纯乙腈封存了。如果第二天不用,最好用纯的有机相封上柱子,同样是1.0ml/min流速冲洗30min。
另,也不是说不清洗就会坏。我们研发有的时候为了赶项目,来不及冲洗色谱柱。柱子不会怎么样。就是寿命会短一点而已。