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c18色谱柱在日常清洗中可分为两种情况进行

点击次数:202 发布时间:2020-08-10
  c18色谱柱以全覆盖的键合硅胶为填料,具有优异的稳定性。独特的单官能团化学键合技术可避免形成复合的c18分子层。均匀的涂层确保了固定相具有高选择性和高效率的分离特点。

  c18色谱柱使用:
  1、首先要确认您所要分析的样品流动相的pH范围是否在您的柱子的pH范围之内,以免损坏柱子硅胶!
  2、接下来就是用你做样品的流动相去平衡柱子,如果您的流动相中含有缓冲盐溶液,在平衡柱子之前务必要先用5%的CH3OH(C2H3N)/水去过渡10倍柱体积(150x4.6mm柱子约为30ml,250x4.6mm柱子约为45ml;下同)以上,再用带盐的流动相去平衡柱子足够的时间(直到基线非常平稳为止),之后方可进样分析。
  3、无论您分析何种样品,都会由于各种原因样品中总有部分杂质,因此建议您在进样前在柱子前端加接保护柱以保护您那昂贵的分析柱,或者用0.2um或 0.45um针头过滤器过滤样品后方进样分析!
 
  c18色谱柱的清洗分两种情况进行:
  1、如果您的样品分析只用到一般的CH3OH,C2H3N和水的流动相(包括流动相里面加了点酸),在做完样品后可直接用65%的C2H3N/水或者纯CH3OH进行清洗10倍柱体积即可保存(如果时间有限,可视情况在仪器能承受的范围内加快流速******为2ml/min);
  2、如果您的样品分析用到了含缓冲盐或者酸或者离子对试剂的流动相,在做完样品后的清洗必须按照下列2个步骤进行清洗柱子(不论您的柱子是否可以耐纯水的极性柱子还是一般的通用性柱子):
  a、***重要的步骤——用5%的C2H3N(CH3OH)/水,清洗20倍柱体积溶剂以上,1~2ml/min(根据时间自由调节流速:如果因为时间来不及而清洗不了那么长时间,可以适当加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子应以0.2~0.5ml/min的流速进行);
  b、65~90%的C2H3N(CH3OH)/水或者纯CH3OH/C2H3N,清洗5~10倍柱体积,1~2ml/min。
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