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新到手的c18色谱柱不要着急使用,先做好其活化工作

点击次数:116 发布时间:2020-08-17
  c18色谱柱具有大的孔径,可用纯水作为流动相,因此,该色谱柱是测定和分析天然和合成多肽以及小分子蛋白质的理想色谱柱。特殊化学键合技术形成单层ODS,在纯水溶液中不会崩解。
 

  c18色谱柱的活化:
  由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%C2H3N/水或者CH3OH溶剂备用,所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气;再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意一定要把管路的端口抵紧柱子的进口以免产生死空间发生漩涡效应降低柱效), 出口端先不接检测器。先以0.1~-0.2ml/min的流速冲洗,等看到有液体从柱子中流出后,持续10mins之后再接上检测器,以循序渐进方式将流速调至1.0ml/min(LC/MS柱子应以0.2ml/min的流速进行),继续活化2小时。
 
  c18色谱柱硅胶填料:
  c18色谱柱采用球形, 高纯度(金属杂质<10 ppm)硅胶为填料,孔径120?,粒径有1.8、2.2、3、5和10 μm,孔体积1.0 mL/g,比表面积350 m2/g,单层全封尾,碳载量19.5%。c18色谱柱特别为各种碱性化合物的分离而设计,pH耐受范围1.5-10.5;
  硅胶:球形,高纯度(金属杂质<10ppm)孔径:120? 粒径:1.8、2.2、3、5和10μm;
  孔体积:1.0mL/g 比表面积:350m2/g 固定相结构:单层全封尾 碳载量:19.5%。
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