液相色谱中鬼峰(非样品来源的异常峰)的产生涉及多因素交互作用，需从流动相制备、系统维护、操作规范等环节进行系统性控制。以下是综合解决方案：
一、流动相污染控制
1. 溶剂与水质管理
- 必须使用HPLC级乙腈或甲醇(紫外吸收干扰较小)，禁止使用普通蒸馏水。水相需现用现配，并添加溶液抑制微生物滋生。
- 有机溶剂(如甲醇、乙腈)开瓶后需密封避光保存，防止挥发性杂质混入。
2. 配制流程优化
- 严格遵循“先混匀后过滤”原则：先将溶剂按比例混合，再用0.45μm滤膜过滤，避免因过滤产生气泡引入杂质。
- 缓冲盐溶液建议每周更换，高盐浓度流动相使用后立即用纯水冲洗系统，防止盐析出结晶。
二、系统污染预防与维护
1. 管路清洁与灭菌
- 每日实验结束后，用纯水冲洗系统30分钟，再用甲醇封存，避免盐分残留。
- 每周用5%硝酸浸泡管路12小时杀灭微生物，尤其注意过滤器、单向阀等死角部位。
2. 色谱柱专项维护
- 每月用甲醇-异丙醇(4:6)反向冲洗色谱柱30分钟，清除柱头吸附的污染物。当理论塔板数下降超过20%时，需更换填料。
- 长期不用时，色谱柱应充满甲醇后密封保存，避免固定相干裂。
3. 检测器与流通池保养
- 检测池气泡可通过提高流速冲洗或轻敲池体排出；若无效，需拆卸超声清洗。
- 氘灯老化会导致基线噪声增大，每年至少更换一次以保证光源稳定性。
三、梯度方法与参数优化
1. 梯度程序设计
- 缩小流动相A/B相的比例差(如A相从90%水降至70%水)，降低因洗脱强度突变引发的气泡风险。
- 延长平衡时间至≥10倍柱体积，确保柱头稳定后再进样。
2. 压力与流速调控
- PEEK管路限压4000psi，遇四氢呋喃(THF)等强溶剂需切换为不锈钢管线。
- 发现压力波动时，优先排查单向阀是否堵塞(可用丙酮超声清洗)。
四、样品前处理与操作规范
1. 样品净化
- 复杂基质样品需经0.22μm滤膜过滤或离心处理，杜绝颗粒物进入系统。
- 溶解样品应采用初始流动相，避免强溶剂效应导致鬼峰。
2. 进样系统管理
- 进样阀每次使用后用强溶剂(如乙腈)清洗，消除残余峰干扰。
- 定量环污染时，可连续注入空白溶剂验证并冲洗。
五、高级技术应用
1. 鬼峰捕获装置
- 在混合器与进样器之间加装专用鬼峰去除柱，可有效吸附流动相杂质，耐受600次以上分析仍有效。需注意离子对试剂会缩短其寿命，需定期更换。
