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如何延长液相色谱分析柱的使用寿命

点击次数:946 发布时间:2015-03-09
   我们知道,液相色谱仪的分离是在液相色谱分析柱中实现的。目前工作中多采用反相色谱柱,如何保护好分离柱,减少柱的污染是延长液相色谱分离柱寿命的关键。

  一、如何维护液相色谱分析柱

  1.加保护柱(预柱)是保护色谱柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱口的化学垃圾,这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头,zui终降低柱效能。保护柱是消耗品,如分析血浆样品,一般分析50个样品后需更换新柱芯。

  2.避免高压冲击液相色谱分析柱。一般色谱柱都能承受得起高压,但经不住突然变化的高压冲击,这将改变柱床体积,影响柱效。引起高压冲击的原因主要有:进样器的样品阀的缓慢转动、泵启动太快、柱切换等操作。用手动进样阀时的压力变化不大,自动进样阀由于切换较慢,可能会造成压力冲击。

  3.合理选择液相色谱分析柱。我们知道,选择色谱分离柱主要根据两点,一是根据待测组分的分子量的大小;二是根据流动相条件,包括PH值、离子强度和溶剂极性等。

  4.定期冲洗液相色谱分离柱。每次分析工作结束时,冲洗完缓冲盐后,zui后要过度到用强溶剂冲洗柱子,如可用色谱纯甲醇、乙腈冲洗反相C18柱,目的是冲去吸附在柱上的强保留组分。如果用甲醇/水为流动相也应这样冲洗柱子,在一定程度上可恢复柱效。

  二、怎样减少液相色谱分析柱的污染

  zui有效的办法是纯化样品。我们在多年的分析工作中发现,凡是样品纯化的越干净,分离柱的寿命就越长;反之,只有提取没有纯化的样品,分离柱柱效下降较快。建立一个理想的色谱分析方法应该有一套有效的样品前处理方法,特别是在分析血浆和尿液样品时,要特别注意样品的提取与纯化,尽量使处理过的样品中杂质(如大分子蛋白、有机物等)降到zui低,保护柱头和柱子。

  提取纯化好的样品用流动相来溶解,一方面减少色谱图中的溶剂峰干扰,另一方面也是检查样品在流动相中的溶解性,如果样品进样后在流动相中沉淀,会堵塞进样器和柱头,甚至样品分解,出现怪峰。如果出现样品与流动相不溶要设法改变溶解条件,如更换样品溶剂,或改进处理样品的方法,或过滤,去除不溶性物质。

  延长液相色谱分析柱的使用寿命,我们可以从保护分离柱和减少污染两个方面入手。

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