进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，分手动和自动两种方式。现在的液相色谱仪所采用的手动进样器几乎都是耐高压、重复性好和操作方便的六通阀进样器，其原理与气相色谱中所介绍的相同。随着HPLC分析仪器的普及和其在自动化程度的提高，自动进样模式取代了原来手动模式，它大大提高了工作效率，增强了分析的精度，消除了人为误差等等优势，越来越多的单位使用自动进样器。一般来说，自动进样器包括进样臂、进样针、样品盘、清洗系统、驱动系统以及控制系统等部分组成，各个部分之间紧密合作，共同带动着自动...

在使用高效液相色谱系统进行日常分析检测的过程中，有时会遇到色谱峰峰面积重现性差的问题，导致无法对组分进行准确定量。出峰面积重现性差的话，首先要看保留时间是否稳定。如果保留时间都不稳定，那也不用说出峰面积的稳定了。而保留时间的稳定性，跟系统的压力、流动相比例、流动相的脱气以及色谱柱都有关系。导致色谱峰峰面积重现性差的常见原因及解决方法：1、检查进样量及进样操作进样量不符合要求或者进样时操作失误，都可能导致色谱峰面积重现性差。如果是使用手动进样器且方法要求进样量小于定量环体积，必...

液相色谱柱的损坏70-80%都是由于柱压升高导致的，色谱柱使用了一段时间以后，压力会有所升高，达到一定程度以后色谱柱就会报废，如果在一天之内压力升高了2-5个mpa，或者在几次使用后压力就翻倍的升高，这些都是异常状况，那建议进行排除。一、色谱柱保存不当原因：色谱柱如较长时间不用，重新启用后需按说明书的活化方法重新活化后再使用，否则也会出现柱压升高，柱效下降。解决办法：按说明书重新活化色谱柱。原因：除另有规定外，一般反相色谱柱都需保存在高比例有机相中，以防止微生物滋生。否则，重...

标准曲线法，分为外标法和内标法。外标法在液相色谱中用的较多。内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的较多。1、外标法用被测化合物的纯品作为标准样品，配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱的到其响应值（峰面积）。在一定范围内，标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。在*相同的实验条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。外标法的优点：操作、计算简单，是一种常用的定量方法；无需各组分都被检出、洗脱；需要标样；...

紫外检测器的使用覆盖面达到HPLC检测器的75%，在各个领域得到了广泛的应用，特别是在药品、环保、生命科学、粮食科学、农业科学、食品科学、医疗卫生等领域，应用更加广泛。国际上生产HPLC的厂商很多，无一不带紫外检测器。中国也有10几家生产HPLC的企业。基本上都带紫外检测器。有的HPLC只有紫外检测器一种，而无其它类型的检测器。紫外检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。...

C18色谱柱因键合方式的不同、粒径的不同、长度的不同，内径的差异等多方面因素，呈现出不同选择性。这样，在市场上就出现了数百种具有不同分离选择特性的C18色谱柱。对于传统的C18色谱柱，pH值使用范围通常为2～7，因为pH值高于8时C18固定相会受到限制。由于残余硅羟基的存在，易对碱性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾，影响分离与分析。pH值太低则会使键合的烷基脱落，而且对成分的分离达不到要求。1、酸性条件下C18的选择为了改善C18色谱柱在低pH值时的稳定性，有人提出了空间位阻...

紫外检测器（ultraviolet－visibledetector，UVD）是HPLC中应用广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。紫外检测器主要由光源、分光系统、检测池和检测系统四大部分组成，从光源分光系统得到的特定波长的单色光通过检测池时，一部分光被溶液中的吸光性溶质吸收，剩余的透射光到达检测系统后光信号转换成电信号...

色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。只有了解影响色谱柱性能的因素，才能结合目标分析物的性质、需要达到的分析效果及实验室条件来选择适合的色谱柱。(1)硅胶纯度硅胶纯度和残留金属离子浓度，硅胶的杂质会影响化合物的峰形，硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形，易发生拖尾。(2)色谱柱尺寸填料床的长度和内径，增加色谱柱长度，可以在一定程度上提高柱效，但也会升高压力和导致峰展宽；宽柱径，提高载样量，但也会增加横向扩散，同样会导致峰展宽。窄柱径可以节约...