柱温箱一般会遇到的问题：1、柱温箱开机后，屏幕亮了但是没有显示。故障分析：柱温箱显示屏亮，但是没有显示这种情况可能是控制显示器的电路板接触不良或是损坏，因为这个部件刚好在靠近柱温箱门的地方，经常开门可能造成信号线松动甚至断开。解决方法：首先找到柱温箱底部连接电路板的线，检查卡槽是否松动，信号线是否有断开的情况；若信号线无异常，则说明控制电路板坏了，只能找到厂家售后维修。2、柱温箱发出警报声后停止工作。故障分析：柱温箱报警说明操作过程中有不当的行为使柱温箱无法正常工作或者加热过...

进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，分手动和自动两种方式。现在的液相色谱仪所采用的手动进样器几乎都是耐高压、重复性好和操作方便的六通阀进样器，其原理与气相色谱中所介绍的相同。随着HPLC分析仪器的普及和其在自动化程度的提高，自动进样模式取代了原来手动模式，它大大提高了工作效率，增强了分析的精度，消除了人为误差等等优势，越来越多的单位使用自动进样器。一般来说，自动进样器包括进样臂、进样针、样品盘、清洗系统、驱动系统以及控制系统等部分组成，各个部分之间紧密合作，共同带动着自动...

在使用高效液相色谱系统进行日常分析检测的过程中，有时会遇到色谱峰峰面积重现性差的问题，导致无法对组分进行准确定量。出峰面积重现性差的话，首先要看保留时间是否稳定。如果保留时间都不稳定，那也不用说出峰面积的稳定了。而保留时间的稳定性，跟系统的压力、流动相比例、流动相的脱气以及色谱柱都有关系。导致色谱峰峰面积重现性差的常见原因及解决方法：1、检查进样量及进样操作进样量不符合要求或者进样时操作失误，都可能导致色谱峰面积重现性差。如果是使用手动进样器且方法要求进样量小于定量环体积，必...

液相色谱柱的损坏70-80%都是由于柱压升高导致的，色谱柱使用了一段时间以后，压力会有所升高，达到一定程度以后色谱柱就会报废，如果在一天之内压力升高了2-5个mpa，或者在几次使用后压力就翻倍的升高，这些都是异常状况，那建议进行排除。一、色谱柱保存不当原因：色谱柱如较长时间不用，重新启用后需按说明书的活化方法重新活化后再使用，否则也会出现柱压升高，柱效下降。解决办法：按说明书重新活化色谱柱。原因：除另有规定外，一般反相色谱柱都需保存在高比例有机相中，以防止微生物滋生。否则，重...

标准曲线法，分为外标法和内标法。外标法在液相色谱中用的较多。内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的较多。1、外标法用被测化合物的纯品作为标准样品，配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱的到其响应值（峰面积）。在一定范围内，标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。在*相同的实验条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。外标法的优点：操作、计算简单，是一种常用的定量方法；无需各组分都被检出、洗脱；需要标样；...

紫外检测器的使用覆盖面达到HPLC检测器的75%，在各个领域得到了广泛的应用，特别是在药品、环保、生命科学、粮食科学、农业科学、食品科学、医疗卫生等领域，应用更加广泛。国际上生产HPLC的厂商很多，无一不带紫外检测器。中国也有10几家生产HPLC的企业。基本上都带紫外检测器。有的HPLC只有紫外检测器一种，而无其它类型的检测器。紫外检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。...

C18色谱柱因键合方式的不同、粒径的不同、长度的不同，内径的差异等多方面因素，呈现出不同选择性。这样，在市场上就出现了数百种具有不同分离选择特性的C18色谱柱。对于传统的C18色谱柱，pH值使用范围通常为2～7，因为pH值高于8时C18固定相会受到限制。由于残余硅羟基的存在，易对碱性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾，影响分离与分析。pH值太低则会使键合的烷基脱落，而且对成分的分离达不到要求。1、酸性条件下C18的选择为了改善C18色谱柱在低pH值时的稳定性，有人提出了空间位阻...

紫外检测器（ultraviolet－visibledetector，UVD）是HPLC中应用广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。紫外检测器主要由光源、分光系统、检测池和检测系统四大部分组成，从光源分光系统得到的特定波长的单色光通过检测池时，一部分光被溶液中的吸光性溶质吸收，剩余的透射光到达检测系统后光信号转换成电信号...